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检测dna浓度的仪器叫什么

时间:2025-04-22 17:12:07 作者:小编 点击:

1.紫外分光光度计类

这类仪器通过检测DNA溶液对紫外光的吸收特性来计算浓度,操作简便且成本较低。

原理:

DNA分子在260 nm波长处有最大吸收峰(A260),其吸光度与浓度呈正比(1 A260≈50μg/mL双链DNA)。同时,通过A260/A280比值可评估纯度(纯DNA的比值约1.8-2.0),A260/A230比值可检测有机溶剂或盐类污染。

代表仪器:

Nanodrop系列(如Nanodrop 2000):仅需1-2μL样本,无需稀释即可快速检测,适用于高纯度样本的常规分析。

超微量分光光度计(如Nano-400A、NANO-200):支持微量检测(0.5-2μL),内置触摸屏和打印机,适合实验室快速筛查。

局限性:

易受蛋白质、RNA或化学杂质干扰,低浓度样本(<10 ng/μL)误差较大。

检测dna浓度的仪器叫什么

2.荧光法检测仪

基于荧光染料与DNA结合后发光的特性,灵敏度更高,适合低浓度或复杂样本。

原理:

染料(如PicoGreen、Qubit试剂)特异性结合双链DNA,激发后发射荧光,强度与DNA浓度正相关。此方法对污染物容忍度高,可检测低至0.1 ng/μL的样本。

代表仪器:

Qubit荧光计(如Invitrogen Qubit 4):配备触摸屏和内置试剂计算器,操作自动化,广泛用于NGS文库制备和微量样本分析。

BG Quant等荧光微孔板读数器:支持高通量检测,适用于多样本并行分析。

优势:

灵敏度高(比紫外法高1000倍),抗干扰能力强,尤其适合含盐、溶剂或单链DNA的样本。

局限性:

需专用试剂盒,成本较高;部分染料(如溴化乙锭)有毒性,需安全操作。

3.凝胶电泳法

虽非直接定量仪器,但常用于验证DNA完整性和粗略浓度。

原理:

DNA在电场中迁移速率与片段大小成反比,通过与已知浓度的DNA标记(如λ-DNA)比较条带亮度,可估算浓度。

应用场景:

快速评估PCR产物或提取DNA的质量,但定量精度较低(误差约20-50%)。

注意事项:

需结合荧光染料(如EB、MidoriGreen)显色,操作时需防护紫外线。

4.其他特殊仪器

基因测序仪:通过测序前的质检步骤间接评估DNA浓度,适用于高通量测序项目。

真空离心浓缩仪:通过浓缩低浓度样本提高检测下限,常用于法医学微量样本处理。

DIY荧光计:低成本方案,使用安全染料(如MidoriGreen)和开源硬件,适合教学或小型实验室。

如何选择仪器?

高纯度样本:优先选择紫外分光光度计(如Nanodrop)。

低浓度或复杂样本:使用荧光法(如Qubit)。

完整性验证:结合凝胶电泳。

高通量需求:微孔板读数器或自动化设备。

未来趋势

随着技术进步,仪器趋向微型化、智能化和多指标联检。例如,部分设备已整合吸光度与荧光检测模块,可一键完成浓度、纯度和片段分析。此外,便携式设备(如手持式荧光计)正逐步应用于野外或临床现场检测。

通过理解不同仪器的原理和适用场景,研究人员可更高效、精准地完成DNA浓度检测,为后续实验奠定可靠基础。


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