一、原理区别：提取与鉴定的核心差异
1.DNA提取的原理
DNA提取的核心在于利用其物理化学特性与其他生物大分子（如蛋白质、多糖）的差异，通过三步分离：
细胞裂解：通过研磨（植物细胞）或离心（动物细胞如鸡血）破坏细胞膜。
杂质去除：利用高盐溶液溶解DNA（如2mol/L NaCl），低盐条件（0.14mol/L NaCl）沉淀蛋白质；或通过酚氯仿抽提法分离。
DNA纯化：冷乙醇（或异丙醇）沉淀DNA，因DNA在酒精中溶解度极低，而部分蛋白质可溶。
2.DNA鉴定的原理
鉴定侧重于检测DNA的特异性，包括：
化学特性：如二苯胺试剂在沸水浴中与DNA反应显蓝色（需加热，非直接显色）。
物理特性：紫外吸收法（260nm吸光度）定量DNA。
序列特异性：通过PCR扩增特定区域（如STR序列），电泳分离后比对片段长度差异。
关键区别：提取侧重分离纯化，依赖溶解度差异；鉴定侧重特异性验证，依赖序列或理化反应。
二、DNA鉴定的核心步骤与方法
1.样本采集与预处理
常见样本：血液（需裂解红细胞）、口腔黏膜细胞、毛发（需带毛囊）、组织碎屑等。
特殊样本：粪便（需克服细菌污染）需特殊处理。
2.DNA提取（详见原理部分）
关键方法：硅胶柱法（高效纯化）、盐析法（低成本）或磁珠法（自动化）。
3.DNA扩增（PCR技术）
原理：通过温度循环（变性-退火-延伸）指数级扩增目标序列。
应用：STR扩增（亲子鉴定）、SNP检测（疾病筛查）。
4.DNA分型与分析
电泳法：琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段，溴化乙锭染色观察条带。
毛细管电泳：高分辨率检测STR片段长度差异（法医学常用）。
测序法：直接读取碱基序列，用于精准鉴定（如基因突变分析）。
5.数据解读与报告
亲子鉴定：计算亲权指数（CPI），若≥99.99%可确认关系。
个体识别：比对STR分型数据库，匹配概率需达亿分之一。
三、技术难点与注意事项
防污染：全程需无菌操作，避免外源DNA干扰。
防降解：提取时需抑制核酸酶（如加入EDTA）。
特殊样本处理：如骨髓移植者需采集非血液样本（如口腔细胞）。
突变处理：若遇STR位点突变，需增加检测位点（通常检测16-21个）。
四、应用场景示例
法医学：通过现场微量DNA（如皮屑）锁定嫌疑人。
亲子鉴定：比对父母与子女的STR分型，确认生物学关系。
疾病筛查：无创产前检测（NIPT）通过母血中胎儿DNA分析染色体异常。
总结
DNA提取是分离纯化的基础，而鉴定是特异性验证的核心。二者通过溶解度差异、序列扩增和理化反应共同构成现代生物技术的基石，在司法、医疗等领域发挥着不可替代的作用。
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